FLUOVIEW FV5000

Nowy wymiar precyzyjnego obrazowania konfokalnego

FLUOVIEW™ FV5000 wyznacza nowe standardy w mikroskopii konfokalnej, oferując badaczom możliwość uzyskiwania precyzyjnych, ilościowych danych szybciej i przy mniejszym nakładzie pracy. To nie tylko narzędzie do obrazowania — to platforma, która realnie podnosi jakość i wiarygodność wyników badań.

Kluczowym elementem układu jest detektor nowej generacji SilVIR™, oparty na opatentowanej konstrukcji krzemowego fotopowielacza firmy Evident.

Detektor SilVIR™ zapewnia ilościową analizę sygnałów już na poziomie pojedynczych fotonów.

Pełna kwantyfikacja — piksel po pikselu, pomiar po pomiarze

Technologia SilVIR™ umożliwia kwantyfikację sygnału na poziomie pojedynczych fotonów, oferując wyjątkową czułość oraz ultrawysoki stosunek sygnału do szumu w najszerszym w branży zakresie dynamiki. Technologia ta pozwala na jednoczesną rejestrację sygnałów o bardzo niskiej i bardzo wysokiej intensywności fluorescencji bez utraty informacji spowodowanej prześwietleniem lub niedoświetleniem.

System gwarantuje wysoką jakość obrazu w całym zakresie intensywności sygnału. Zarówno sygnały bardzo słabe, jak i intensywne mogą być pozyskiwane z tej samej próbki w jednej akwizycji, bez utraty jakości. Histogramy prezentują zliczenia pojedynczych, rozdzielnych fotonów o ilościowo określonej intensywności i minimalnym tle.

Nowa jakość obrazowania bez prześwietleń — eliminacja nasycenia i potrzeby ponownej akwizycji

Dzięki szerokiemu zakresowi dynamiki detektor SilVIR skutecznie zapobiega obcinaniu i przesterowaniu sygnału, jednocześnie znacząco ograniczając czas potrzebny na ręczne dostosowywanie ustawień. Każda akwizycja dostarcza poprawnych, nienasyconych danych, w pełni gotowych do dalszego przetwarzania — dekonwolucji, składania obrazów (stitchingu) czy rozdzielania spektralnego.

Od pojedynczych zdarzeń fotonowych po intensywną fluorescencję, SilVIR rejestruje pełne spektrum sygnału w jednej akwizycji. Wysoki zakres dynamiczny pozwala zachować słabe detale przy jednoczesnym uniknięciu nasycenia jasnych obszarów, ograniczając potrzebę ponownego obrazowania i zapewniając spójną, ilościową analizę obrazu.

Porównanie:

Nasycenie obrazu widoczne przy użyciu detektora GaAsP-PMT (zaznaczone na czerwono) w zestawieniu z tym samym obrazem zarejestrowanym detektorem SilVIR — bez nasycenia.

Szybkość i rozdzielczość 

FV5000 łączy dwa skanery w jednym, spójnym przebiegu pracy, oferując jednocześnie wysoką gęstość próbkowania i ultraszybkie obrazowanie. Niezależnie od tego, czy potrzebujesz szybkich serii czasowych, czy map o bardzo dużej gęstości pikseli, system elastycznie dopasowuje się do wymagań eksperymentu.

Skaner rezonansowy umożliwia rejestrację dynamicznych procesów komórkowych z pełną klarownością w polu widzenia do 20 mm, przy minimalnym lub zerowym uśrednianiu. Zapewnia to wysokiej jakości surowe obrazy o wysokim stosunku sygnału do szumu (SNR) z prędkością do 438 klatek na sekundę.

Z kolei skanowanie galvo 8K × 8K pozwala obrazować duże obszary z bardzo wysoką rozdzielczością przestrzenną oraz ultraszybkim czasem przebywania piksela — nawet 0,2 µs.

W połączeniu z obiektywami o wysokiej aperturze numerycznej oraz oprogramowaniem FV-OSR możliwe jest osiągnięcie rozdzielczości do 120 nm w płaszczyźnie XY w sześciu kanałach spektralnych, bez konieczności stosowania dodatkowego sprzętu.

Mniej kompromisów. Więcej danych — szybciej.

Dzięki skanowaniu rezonansowemu akwizycja może być nawet do 9 razy szybsza niż przy skanowaniu galvo, przy zachowaniu tej samej jakości obrazu.
Po lewej: 43,5 min — wykonanie stosu przekrojów Z 2K przy skanowaniu galvo (bez uśredniania).
Po prawej: 4,6 min — wykonanie stosu przekrojów Z 2K przy skanowaniu rezonansowym (4× uśrednianie).

Łatwe obrazowanie w superrozdzielczości — precyzyjne odpowiedzi na poziomie subkomórkowym

FV5000 umożliwia obrazowanie w superrozdzielczości bez konieczności stosowania dodatkowego sprzętu. Dzięki połączeniu obiektywów o wysokiej aperturze numerycznej, takich jak seria A Line™ HR, z oprogramowaniem FV-OSR, możliwe jest łatwe rozdzielanie struktur subkomórkowych z dokładnością do 120 nm w płaszczyźnie XY.

Oprogramowanie FV-OSR automatycznie dostosowuje aperturę konfokalną, aby wychwycić i wzmocnić składowe sygnału o wysokiej częstotliwości, generując ostre, szczegółowe obrazy w czasie rzeczywistym. W połączeniu z wysoką czułością detektora SilVIR, FV5000 zapewnia jednoczesną superrozdzielczość w nawet sześciu kanałach spektralnych.

Poniżej: 
Niezrównany zakres dynamiki w połączeniu z łatwym spełnieniem kryterium Nyquista, szerokim polem widzenia oraz odwzorowaniem najdrobniejszych detali. Skanowanie galvo 8192 × 8192, zoom 0,9×, 0,8 a.u., obiektyw LUPLAPO25XO, YPet: 514 / 530–570, zakres Z: 60–150 µm, krok Z: 0,82 µm, MIP.
Skrawek mózgu myszy klarowany metodą SeeDB2. Ekspresja YPet w neuronach piramidowych warstw 2/3 (elektroporacja in utero).

Dynamiczne obrazowanie procesów biologicznych w czasie rzeczywistym

Zobacz biologię w ruchu, z pełnym poziomem szczegółowości. Od eksperymentów FRAP po ablację — ilościowa detekcja SilVIR w połączeniu z szybkim skanowaniem umożliwia rejestrację słabych sygnałów przy minimalnym uśrednianiu, zapewniając wysoki stosunek sygnału do szumu przy rzeczywistych szybkościach klatkowych.

W próbkach żywych precyzyjna stymulacja pozwala na powtarzalne, celowane zaburzenia/ingerencje, dzięki czemu możliwe jest śledzenie procesów naprawy, migracji i sygnalizacji w czasie. Szeroki, liniowy zakres dynamiki pomaga zapobiegać nasyceniu sygnału, utrzymując dane z obrazowania czasowego w pełni gotowe do analizy.

Poniżej:
Sekwencja time-lapse w żywym zarodku danio pręgowanego ukazuje odpowiedź naprawczą po lokalnej, wielofotonowej ablacji mikrotubul (kolor zielony).

Intuicyjność na każdym etapie pracy — dzięki oprogramowaniu FLUOVIEW Smart™

FV5000, zaprojektowany w oparciu o doświadczenia naukowców i uwzględniający ich realne potrzeby badawcze, redefiniuje obrazowanie konfokalne, wyznaczając nowy standard — szybszy, bardziej inteligentny, intuicyjny i wydajny w codziennej pracy laboratoryjnej.

• Smart Sample Search szybko lokalizuje próbkę w osiach XY i Z;
• Smart Auto Laser Power Adjustment wykorzystuje sztuczną inteligencję do optymalizacji stosunku sygnału do szumu w całym zakresie ustawień mocy lasera;
• Intuicyjny interfejs użytkownika umożliwia rejestrację złożonych, wielowymiarowych obrazów za pomocą zaledwie kilku kliknięć;
• Intelligent Shading Correction automatycznie tworzy jednolite, wysokiej jakości obrazy składane (stitching).

Uwaga: Oprogramowanie FLUOVIEW Smart™ jest dostępne dla konfiguracji FV5000 w wersji odwróconej. Nie jest kompatybilne z konfiguracjami bramowymi (gantry), pionowymi ani MPE (Multiphoton Excitation).

Prostota wsparta inteligencją — automatyczna regulacja pierścienia korekcyjnego

Zintegrowana w systemie FV5000 technologia TruResolution™ automatyzuje jedno z najbardziej czasochłonnych zadań w mikroskopii — regulację pierścienia korekcyjnego obiektywu. Jednym kliknięciem system samodzielnie dobiera optymalne ustawienie pierścienia dla konkretnej próbki, eliminując żmudne próby i korekty manualne.

TruResolution precyzyjnie dostraja parametry obiektywu, minimalizując aberracje sferyczne wynikające z grubości szkiełka nakrywkowego oraz niejednorodności próbki w głąb preparatu.
Przy obrazowaniu grubych preparatów TruResolution na bieżąco optymalizuje ustawienia pierścienia w trakcie skanowania w osiach XYZ, utrzymując równomierną ostrość w całej objętości próbki.

Automatyczna regulacja pierścienia korekcyjnego pozwala uzyskać ostrzejsze, bardziej szczegółowe obrazy.

Po lewej: bez automatycznej regulacji pierścienia korekcyjnego.
Po prawej: z automatyczną regulacją pierścienia korekcyjnego.

Funkcja Intelligent Shading Correction – równomierna jakość obrazu na całej powierzchni
Aby uzyskać jednolitą ostrość i precyzję w całym obrazie, funkcja Intelligent Shading Correction automatycznie tworzy płynne, wysokiej jakości obrazy składane (stitchowane).

Intelligent Shading Correction automatycznie kompensuje nierównomierne oświetlenie w całym polu widzenia, umożliwiając generowanie jednolitych obrazów składanych bez konieczności ręcznych korekt, co zwiększa wydajność i spójność przy obrazowaniu dużych obszarów.

Po lewej: bez Intelligent Shading Correction.
Po prawej: z Intelligent Shading Correction.

Oprogramowanie, które nadąża za tempem Twoich badań
Mniej szumu, więcej informacji

Środowisko programowe FV5000 oferuje zaawansowane rozwiązania oparte na AI, które podnoszą jakość obrazów, skracają czas analizy i upraszczają złożone procedury robocze — bez kompromisów w zakresie rzetelności naukowej.
Redukcja szumu TruAI dodatkowo zwiększa i tak wysoki stosunek sygnału do szumu w FV5000, wykorzystując sieci neuronowe wytrenowane na charakterystykach szumu detektorów SilVIR.

Stosowane zarówno w czasie rzeczywistym, jak i po akwizycji, TruAI poprawia czytelność obrazów rezonansowych, zachowuje rozdzielczość czasową i jednocześnie ogranicza fotouszkodzenia próbek.
Dla przyspieszenia dalszych etapów analizy, wstępnie wytrenowane modele AI automatycznie segmentują dane obrazowe, zmniejszając udział pracy ręcznej oraz zapewniając szybsze i bardziej powtarzalne rezultaty między eksperymentami.

U góry: obraz surowy.
Na dole: obraz po zastosowaniu TruAI.

Organoidy nerkowe uzyskane z ludzkich iPSC z GFP w błonie komórkowej. Sygnał GFP wzmocniony immunologicznie (przeciwciało pierwotne anty-GFP i wtórne Alexa Fluor 488); laminina-111/211 znakowana Alexa Fluor 568; jądra barwione DAPI. Akwizycja z użyciem jednofalowych laserów IR na światłowodzie (920 nm i 1064 nm), umożliwiających jednoczesne trzykanałowe obrazowanie wielofotonowe przy skanowaniu rezonansowym 2K.

Segmentacja obrazu oparta na głębokim uczeniu

Więcej niż klasyczne progowanie

Klasyczne metody segmentacji oparte na progach intensywności często są czasochłonne, mało powtarzalne i wrażliwe na zmienność warunków próbek.

Rozwiązanie TruAI wykorzystuje algorytmy głębokiego uczenia do identyfikowania subtelnych struktur i słabych sygnałów, które umykają metodom tradycyjnym. Dzięki temu możliwa jest dokładna, stabilna segmentacja słabo znakowanych obiektów oraz złożonych tkanek — niezależnie od zmienności danych.

Precyzyjne rozróżnianie komórek i szybsze uzyskiwanie wiarygodnych wyników

Obrazowanie i analiza sferoidów z wykorzystaniem TruAI.
Po lewej: bez TruAI.
Po prawej: z TruAI.
TruAI umożliwia segmentację i klasyfikację komórek nawet na dużych głębokościach obrazowania, gdy sygnał jąder barwionych DAPI ulega osłabieniu wskutek rozpraszania światła.

Niezawodność i elastyczność

Zaprojektowany z myślą o długoterminowej precyzji — stworzony, by służyć przez lata

FV5000 został zaprojektowany tak, aby zapewniać długoterminową precyzję i możliwość łatwej adaptacji do zmieniających się potrzeb badawczych. Zapewnia stabilność i elastyczność oczekiwaną w nowoczesnych laboratoriach, pozwalając na konfigurację dopasowaną do bieżących zadań oraz bezproblemową rozbudowę wraz z rozwojem projektów.

Wraz z postępem badań system można rozszerzać o dodatkowe detektory, kamery czy źródła laserowe, a także uzupełnić go o moduł MPE do obrazowania wielofotonowego, obsługujący akwizycję jedno- i wielofotonową oraz generację drugiej i trzeciej harmonicznej. Inteligentne komponenty sprzętowe i programowe na bieżąco kontrolują i optymalizują parametry pracy, gwarantując spójność oraz wysoką powtarzalność wyników.

Stabilność i powtarzalność wyników

FV5000 utrzymuje wysoką precyzję pomiarową dzięki aktywnemu monitorowaniu pracy systemu. Laser Power Monitor (LPM) zapewnia stabilną moc lasera pomiędzy kolejnymi sesjami, umożliwiając różnym użytkownikom wykonywanie pomiarów w identycznych warunkach — nawet w odstępie dni lub tygodni. Taka stabilność jest kluczowa dla badań ilościowych i długoterminowych.

Więcej kolorów. Więcej danych.

Rejestruj więcej kolorów i wydobywaj więcej informacji z każdego obrazu dzięki zaawansowanym możliwościom multipleksowania systemu FV5000.

Udoskonalona technologia TruSpectral™ w połączeniu z wysokoczułym detektorem SilVIR umożliwia jednoczesne pozyskiwanie danych z maksymalnie sześciu kanałów, elastycznie konfigurowanych z użyciem detektorów szerokopasmowych oraz przesuniętych ku czerwieni.

Takie rozwiązanie pozwala na pracę z szerszym i bardziej zróżnicowanym zestawem fluorochromów oraz wspiera elastyczne projektowanie eksperymentów, pomagając ograniczyć autofluorescencję i fotouszkodzenia podczas obrazowania żywych komórek.

Modułowa architektura układu laserowego umożliwia równoległe wykorzystanie do 10 linii laserowych w zakresie długości fal od 405 do 785 nm. 

Przykładem możliwości systemu jest wysokorozdzielczy, pięciokanałowy obraz konfokalny zarodka, wykonany z użyciem DAPI oraz barwników Alexa Fluor™ 488, 568, 647 i 750, ukazujący precyzyjne detale w wielu pasmach fluorescencji.